Скрининг рака шейки матки (ко-тестирование): жидкостная цитология соскоба шейки матки и цервикального канала и исследование биоценоза урогенитального тракта Фемофлор II (определение ДНК)

Метод исследования: Жидкостная технология BD SurePath / Lituo LTS-3000B /полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.

Взятие данного биоматериала осуществляет врач-гинеколог. Адреса приема врачей акушеров-гинекологов: г. Нижний Новгород, ул. Белинского, 38 и пр-кт Ленина, 31. Запись по телефону горячей линии 8-800-100-08-05.

Ко – тестирование (одновременное проведение жидкостной цитологии, Пап-теста и дифференциального определения ДНК вируса папилломы человека) позволяет эффективно провести  оценку изменений слизистой цервикального канала и шейки матки из взятого однократно одного вида биоматериала. Проведение ко –  тестирования при обследовании женщин на рак шейки матки после 30 лет позволяет увеличить временной интервал между скринингами с трех до пяти лет и на ранних этапах диагностировать изменения (метаплазию) слизистой. Каждый из этих методов обладает преимуществом и недостатками. Например, метод молекулярного обнаружения ВПЧ не позволяют отличить транзиторную инфекцию от персистирующей, нельзя дифференцировать доброкачественно проходящие инфекцию и клинически значимую, с внедрением ВПЧ в геном клеток эпителия шейки матки и развитием предраковых изменений. А Пап-тест имеет менее высокие показатели чувствительности (55-74%) и  специфичности (63,2-99,4%), ограниченную воспроизводимость, оценка результатов носит субъективный характер.

Именно поэтому ко-тестирование – надежный и эффективный метод диагностики.

Данное исследование включает комплексную диагностику возможной патологии эпителия шейки матки и определение микробиома генитального тракта. Фемофлор II .

ФЕМОФЛОР II - универсальный тест нового поколения для оценки состояния женской микробиоты с расширенными возможностями. Тест ФЕМОФЛОР II предназначен для комплексной оценки микробиоты урогенитального тракта женщин методом ПЦР в режиме реального времени. Он включает детальную оценку нормобиоты (определение содержания лактобактерий и бифидобактерий, типирование лактобактерий), расширенный перечень представителей условно-патогенных микроорганизмов, а также выявление патогенов (основные ИППП, герпесвирусы и ВПЧ).

Исследование позволяет выявить и определить количество ДНК:

• представителей нормобиоты (Lactobacillus spp., Lactobacillus iners, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus jensenii / Lactobacillus mulieris, Lactobacillus gasseri / Lactobacillus paragasseri, Bifidobacterium spp.);
• условно-патогенных микроорганизмов Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis, Candida spp., Candida albicans, Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Streptococcus agalactiae, Enterobacteriaceae, Enterococcus spp., Haemophilus spp., Gardnerella vaginalis, Fannyhessea vaginae, Mobiluncus spp., Anaerococcus spp., Peptostreptococcus spp., Bacteroides spp. / Porphyromonas spp. / Prevotella spp., Sneathia spp. / Leptotrichia spp. / Fusobacterium spp., Megasphaera spp. / Veillonella spp. / Dialister spp., BVAB1/BVAB2/BVAB3;
• патогенных микроорганизмов Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, герпесвирусов HSV1, HSV2, цитомегаловируса;
• количественное раздельное определение генотипов высокого канцерогенного риска HPV 16, HPV 18, HPV 45 и определение количественного содержания группы генотипов HPV: 31/33/35/39/51/52/56/58/59/66/68.

Проведение исследования Фемофлор II дает возможность:

• дифференциации видов лактобактерий -  (согласно литературным данным, отмечается явное преобладание L. crispatus в биотопе здоровых женщин, в то время как L. gasseri и L. iners в 4 раза чаще встречаются у женщин с бактериальным вагинозом). Исследования показывают, что L. crispatus активно продуцируют перекись водорода в сравнении с  другими видами лактобактерий и это объясняет разницу в их  защитных свойствах. L. jensenii также является сильным производителем перекиси водорода, однако, большинство исследователей сегодня пришли к выводу, что присутствие этого вида лактобактерий связано с высоким риском замещения нормальной микрофлоры влагалища патологической. L. iners не продуцирует перекись водорода и имеет способность адаптироваться к повышенным значениям pH вагинальной среды. Зато L. iners продуцирует токсин, близкий по свойствам к белку, вырабатываемому Gardnerella vaginalis, и в условиях недостаточной кислотности (при рН 4,5-6,0) его выработка происходит в 6 раз активнее, чем при рН менее 4,5. При этом происходит гибель других видов лактобактерий, снижение концентрации молочной кислоты и повышение рН вагинальной среды. Все это приводит к размножению анаэробов, ассоциированных с бактериальным вагинозом, которые стремительно занимают освободившуюся нишу;

Данное исследование позволяет выявить:

• количество ДНК стрептококка группы Б (Streptococcus agalactiae), что особенно актуально при подготовке и во время беременности;
• количество облигатных патогенов для исключения бессимптомного и стертого течения инфекций;
• провести дифференциацию и количественное определение уреаплазм, Candida albicans;
• выявить ДНК  патогенов - Сhlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis;
• выявить ДНК репродуктивно значимых вирусных инфекций (HSV-1, HSV-2, CMV);
• провести генотипирование вируса папиломы человека (HPV 16, HPV 18, HPV 45, и группы HPV 31/ 33/ 35/ 39/ 51/ 52/ 56/ 58/59/ 66/ 68 – результат выдается суммарно в группе).

Рак шейки матки (РШМ) – это злокачественная опухоль вирусной природы. На сегодняшний день установлено, что наиболее частой причиной развития заболевания является  именно вирус папилломы человека (ВПЧ). Рак шейки матки занимает II место в мире среди злокачественных опухолей репродуктивных органов у женщин и уступает только раку молочной железы. Основополагающим фактором развития РШМ является ВПЧ. Вирус поражает клетки эпителия кожи и слизистых оболочек. ВПЧ классифицируют на группы высокого и низкого риска в соответствии с их возможностью приводить к развитию рака: К генотипам высокого онкогенного риска относят 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 51,52, 56, 58, 59, 66 и 68. К генотипам низкого онкогенного риска – 6, 11, 42, 43, 44. Вирусы передаются при тесном контакте с пораженными участками кожи и слизистых оболочек. Основной путь передачи ВПЧ аногенитальной группы – половой.

Основная опасность, которую несет инфицирование вирусами данной подруппы, является риск развития рака шейки матки (РШМ). Этиологическая роль ВПЧ в развитии РШМ на сегодняшний день не вызывает сомнений. Эпидемиологические и вирусологические исследования показали, что ВПЧ является причиной РШМ в 100% случаев, рака заднего прохода – в 90%, рака вульвы и влагалища – в 40%, и только в 12% случаев – орофарингеального рака. РШМ является значимой проблемой для здравоохранения России. В нашей стране ежегодно регистрируют около 12 тыс. новых случаев, а примерно 6 тыс. заболевших умирает.

Важно отметить, что инкубационный период может длиться от нескольких месяцев до нескольких лет.  Для инфекции характерно скрытое течение заболевания, без явных клинических проявлений, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании может выявляется норма. В 80% случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР. Выявление ВПЧ-инфекции при дисплазии эпителия шейки матки обладает большой прогностической значимостью и позволяет судить о степени канцерогенного риска.

Несмотря на успехи в разработке и внедрении вакцин против наиболее часто встречающихся канцерогенных типов ВПЧ, на сегодняшний день наиболее важным методом профилактики РШМ является скрининговое обследование женского населения на наличие маркера предраковой стадии папилломавирусной инфекции – цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN, SIL). Хорошо известно, что в большинстве экономически развитых стран Европы и Северной Америки внедрение программ скрининга позволило значительно снизить заболеваемость РШМ.

Многочисленные международные исследования продемонстрировали более высокую чувствительность ВПЧ-тестов в выявлении CIN в сравнении с цитологическими.  В то же время одновременное применение двух методов позволяет более эффективно проводить раннюю диагностику изменений слизистой.

Цитологический анализ включает получение и обработку материала, его микроскопию и морфологическую оценку, определение природы процесса, формулирование заключения с установлением нозологической формы заболевания в соответствии с принятыми морфологическими классификациями. Цитологический метод позволяет проводить дифференциальную диагностику злокачественного новообразования с неопухолевыми или  предопухолевыми поражениями, диспластическими реактивными, воспалительными изменениями различной локализации, уточнить стадию процесса, выявить ранние и поздние рецидивы, персистенцию опухоли после лечения. Особенностью злокачественного процесса является способность к инфильтрирующему, инвазивному росту, то есть к прорастанию в окружающие ткани, в просвет кровеносных и лимфатических сосудов, создавая предпосылки к метастазированию.

Показания для проведения анализа:

• скрининговая диагностика патологии шейки матки;
• наличие папилломатозных разрастаний на слизистых;
• мониторинг эффективности лечения;
• оценка степени канцерогенного риска у женщин с дисплазией эпителия шейки матки;
• наличие факторов риска инфицирования ВПЧ (раннее начало половой жизни, большое количество партнеров, инфицированность другими инфекциями, передаваемыми половым путем, наличие среди ближайших родственников рака шейки матки, папилломатоза внутренних органов;

Рекомендовано проводить обследование с 21 года независимо от начала половой жизни с интервалом в 3 года при отсутствии выявленной патологии или с 18 лет при высокой степени сексуальной активности.