Определение профиля мутаций: мутация V617F в 14 экзоне и делеции в 12 экзоне гена Jak-2 киназы, мутации в гене Mpl-1 и мутации в 9 экзоне гена CALR (кальретикулин), качественный метод (14.88)

Метод исследования: молекулярно-генетический.

Миелопролиферативные заболевания (МПЗ) представляют собой гетерогенную группу нарушений гемопоэза, сопровождающихся множественной гиперплазией клеток костного мозга. Их диагностика сложна и часто основывается на критериях исключения. Одним из наиболее диагностически значимых критериев для МПЗ является наличие мутации V617F в 14 экзоне и делеции в 12 экзоне в гене Jak2.

JAK2 (Janus kinase, a protein tyrosine kinase) цитоплазматическая тирозинкиназа участвует в передаче сигнала по пути “JAK-STAT” (Signal transducers and activators of transcription). Ген JAK2 кодирует белок-тирозинкиназу, который передает сигналы, контролирующие рост и деление клеток крови.

Мутация V617F нарушает аутоингибиторное взаимодействие между JH2- доменом и киназной областью и повышает киназную активность JAK2 белка. Клинически это проявляется усиленной клональной пролиферацией клеток-предшественников миелоидного ростка кроветворения.

Делеции в 12-м экзоне гена JAK2 — это генетические изменения, которые играют важную роль в диагностике миелопролиферативных заболеваний, в первую очередь истинной полицитемии. Делеции в 12-м экзоне JAK2 — это мутации, при которых теряется небольшой участок ДНК в этом гене. Эти делеции приводят к тому, что белок становится постоянно активным, вызывая неконтролируемое размножение клеток крови. Они являются альтернативой более известной мутации JAK2 V617F, которая обнаруживается примерно у 95% пациентов с истинной полицитемией. Делеции в 12-м экзоне встречаются значительно реже — примерно в 2–4% случаев истинной полицетемией. Поиск делеций особенно важен, когда у пациента есть симптомы истинной полицитемии, но тест на JAK2 V617F дает отрицательный результат. В отличие от пациентов с мутацией V617F, у которых часто повышены все три ростка крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), носители делеций в 12-м экзоне, как правило, имеют изолированный эритроцитоз (значительное повышение эритроцитов и гематокрита при нормальных или незначительно повышенных уровнях лейкоцитов и тромбоцитов). Они также, как правило, моложе пациентов с V617F

Мутации в гене Mpl-1 - одна из ключевых мутаций, которые лежат в основе развития миелопролиферативных заболеваний. В отличие от делеций в 12-м экзоне JAK2, ассоциированных в основном с истинной полицитемией, мутации MPL играют главную роль в патогенезе эссенциальной тромбоцитемии и первичного миелофиброза . Ген MPL кодирует белок — рецептор тромбопоэтина. Этот рецептор находится на поверхности клеток-предшественников крови и, связываясь с гормоном тромбопоэтином, дает сигнал к их росту и делению. Особенно важен этот путь для образования клеток-предшественников тромбоцитов. Мутации приводят к выраженному тромбоцитозу, при этом у пациентов часто отмечаются более низкий уровень гемоглобина и нормальный уровень эритропоэтина по сравнению с JAK2-положительными пациентами.

Мутации в 9-м экзоне гена CALR —второй по частоте тип мутаций при миелопролиферативных новообразованиях, особенно у пациентов без мутации JAK2 V617F. Они играют важную роль в диагностике эссенциальной тромбоцитемии и первичного миелофиброза и, в отличие от мутаций JAK2, ассоциированы с более благоприятным прогнозом. Мутантный белок приобретает способность связываться с рецептором тромбопоэтина (MPL) на поверхности клеток крови и постоянно активировать его. Это приводит к неконтролируемой активации пути JAK-STAT и бесконтрольному размножению клеток крови, особенно тромбоцитов. Мутации CALR обнаруживаются примерно в 60-80% случаев JAK2-негативного первичного миелофиброза и в 70% случаев JAK2-негативной эссенциальной тромбоцитемии. Пациенты с мутациями CALR, как правило, моложе пациентов с мутацией JAK2 V617F. У них наблюдается более высокий уровень тромбоцитов, но при этом более низкий уровень гемоглобина и лейкоцитов. У них также реже встречаются тромботические осложнения. Наличие мутации CALR при миелофиброзе ассоциировано с более длительной общей выживаемостью и более низким риском тромбозов по сравнению с мутацией JAK2.

Показания к исследованию: