PML::RARA тип bcr 1-2 - t(15;17), количественный метод (14.5)

Биоматериал принимаем в Чебоксарах - во вторник до 11:00, в остальных отделениях - в среду до 11:00.

Выявление экспрессии химерного онкогена PML/RARA типов bcr 1,2 - продукта хромосомной транслокации t(15;17) у пациентов с острым промиелоцитарным лейкозом (ОМЛ-М3) используется для определения тактики лечения, прогноза эффективности химиотерапии и оценки риска возникновения рецидива.

Молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене PML-RARA тип bcr 1-2 - t(15;17), количественный метод (14.5).

Метод исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Химерный (слитный)  аномальный ген PML-RARA образуется в результате случайной поломки в ДНК, хромосомной перестройки гена PML на хромосоме 15 и гена RARA на хромосоме 17. Белок, который производит этот ген, блокирует созревание клеток крови (промиелоцитов), что приводит к развитию лейкоза. Следствием этой хромосомной перестройки в 98% случаев является острый промиелоцитарный лейкоз.

Обнаружение данной транслокации t(15;17) - "золотой стандарт" диагностики острого промиелоцитарного лейкоза.

Транслокация может происходить в разных точках разрыва (breakpoint) генов. Выделяют три основных варианта: bcr1 (long form), bcr2 (variable form) и bcr3 (short form).

t(15;17) — это хромосомная транслокация (обмен участками) между 15-й и 17-й хромосомами. В результате участок гена PML (на 15-й хромосоме) соединяется с участком гена RARA (на 17-й), и образуется химерный (слитный) ген PML-RARA.

В зависимости от места точки разрыва в гене PML формируются разные варианты химерного транскрипта (молекулы РНК): bcr1, bcr2 и bcr3. Когда говорят «тип bcr 1-2», имеют в виду, что в опухолевых клетках обнаружены сразу два варианта - и bcr1, и bcr2.

Выявление PML-RARA при t(15;17) - это патогномоничный маркер (то есть характерный, специфичный) для острого промиелоцитарного лейкоза (ОПЛ) — особой формы острого миелоидного лейкоза.

Показания к исследованию:

• Подтверждение диагноза. Обнаружение химерного гена позволяет  подтвердить диагноз ОПЛ, даже если в образце немного патологических клеток. Это критически важно, потому что морфологически (под микроскопом) ОПЛ иногда нужно дифференцировать с другими формами лейкоза. Более того, в 5–10% случаев классическая транслокация t(15;17) визуально не видна при цитогенетическом анализе, но транскрипт PML-RARA всё равно обнаруживается. Согласно клиническим рекомендациям « Острый промиелоцитарный лейкоз», 2025г, рекомендуется всем пациентам с подозрением на ОПЛ до начала лечения выполнить цитогенетическое исследование (кариотип), а также для получения быстрого ответа о наличии химерного гена PML::RARА - определение экспрессии pML-RAR-a (количественное), молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене  PML-RARA методом ПЦР для верификации диагноза и выполнения в дальнейшем мониторинга минимальной остаточной болезни.
• Основа для таргетной терапии. Наличие PML-RARA — прямое показание к назначению специфического лечения.
• Уточнение молекулярного подтипа. Хотя сам по себе вариант (bcr1, bcr2, bcr3) не определяет прогноз заболевания, его знание помогает врачу лучше понять биологию опухоли у конкретного пациента и в ряде случаев точнее подобрать терапию. Например, есть данные, что разные варианты могут по-разному влиять на чувствительность к компонентам лечения.
• Мониторинг лечения и рецидивов. После начала терапии регулярно контролируют уровень транскриптов PML-RARA (с помощью количественной ПЦР). Снижение уровня говорит об ответе на лечение, а стабильный или растущий уровень может сигнализировать о риске рецидива задолго до появления клинических симптомов. Также это помогает выявлять минимальную остаточную болезнь (МОБ) — остаточные опухолевые клетки в ремиссии.

Выявление мутации в гене PML-RARA однозначно подтверждает диагноз острого промиелоцитарного лейкоза. Кроме того, наличие транслокации t(15;17) делает опухолевые клетки чрезвычайно чувствительными к действию третиноина (ATRA — полностью транс-ретиноевая кислота) и мышьяка триоксида (ATO). Это основа таргетной (прицельной) терапии ОПЛ, которая в корне изменила прогноз при этом заболевании с крайне неблагоприятного на очень хороший.

Целью лечения является снижение уровня PML-RARA в костном мозге и крови. Полная молекулярная ремиссия – отсутствие его выявления. Если его уровень перестает снижаться или начинает расти - это признак рецидива, что требует коррекции терапии.