Исследование кала на гельминтозы методом ПЦР: аскаридоз (Ascaris lumbricoides), энтеробиоз (Enterobius vermicularis), описторхоз (Opisthorchis felineus), тениоз (Taenia solium), дифиллоботриоз (Diphyllobothrium latum) (Гельмо-скрин, определение ДНК), (качеств.)

Аскаридоз – антропонозный геогельминтоз, вызываемый Ascaris lumbricoides, характеризующийся поражением дыхательных путей и аллергическими реакциями в фазе миграции личинок, а при паразитировании половозрелых гельминтов – хроническим поражением желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) с возможными тяжелыми осложнениями. Возбудителя аскаридоза Ascaris lumbricoides относят к типу круглых червей Nemathelmintes, классу Nematoda, отряду Ascaridia, семейству Ascaridae.

Человек является единственным хозяином Ascaris lumbricoides. В миграционной фазе аскаридоза человек является промежуточным хозяином, в кишечной фазе – окончательным хозяином. Во внешнюю среду с калом больной аскаридозом выделяет незрелые яйца, в которых при благоприятных условиях созревают личинки. Механизм заражения – фекально-оральный. Пути передачи – пищевой (основной) и водный. Заражение происходит при проглатывании яиц гельминта, содержащих инвазионную личинку. Факторами передачи служат овощи, фрукты, зелень, ягоды, на поверхности которых имеются зрелые яйца аскарид, а также загрязненные вода и руки. В зоне умеренного климата сезон заражения аскаридозом длится с апреля по октябрь, в зоне теплого влажного климата – круглый год.

Клинические проявления аскаридоза зависят от интенсивности инвазии и фазы развития заболевания. Выделяют две фазы: раннюю (миграционную, личиночную) и позднюю (кишечную, фазу паразитирования половозрелых аскарид). При малой интенсивности инвазии ранняя фаза аскаридоза может протекать субклинически или бессимптомно. При высокой интенсивности инвазии наблюдается острое начало заболевания. У больных отмечается слабость, недомогание, субфебрильная температура. Нарушение общего самочувствия (нарушение аппетита, сна, утомляемость, слабость отражают степень выраженности синдрома интоксикации у больных. Иногда отмечается высокий фебрилитет и озноб, сыпь, отек Квинке - могут указывать на миграционную фазу аскаридоза, а боли в животе, диспептические явления (тошнота, диарея) - могут свидетельствовать о кишечной фазе заболевания, соответствующей фазе паразитирования половозрелых гельминтов. Появляются респираторные симптомы: кашель сухой или влажный (с незначительным количеством слизистой или кровянистой мокроты), возможны приступы удушья.

Энтеробиоз – антропонозный контагиозный гельминтоз, проявляющийся зудом в перианальной области, диспепсическими расстройствами, преимущественным хроническим течением из-за повторных самозаражений больного (аутоинвазия). Энтеробиоз является самым распространенным гельминтозом человека. Инкубационный период заболевания составляет 3-6 недель. Выраженность клинических проявлений зависит от реактивности макроорганизма и интенсивности заражения.

Наиболее ранний симптом – зуд в перианальной области, возникающий чаще в ночное время, обусловленный выходом остриц из анального отверстия и раздражением ими кожи перианальной области. Зуд появляется периодически, продолжается 3-4 дня, затем проходит и возобновляется через 2-3 недели, что связано с созреванием самок остриц новых поколений, генерированных реинвазией. Рецидивирующий перианальный зуд приводит к формированию астено-невротического синдрома, что проявляется раздражительностью, бессонницей, снижением работоспособности, головными болями, утомляемостью, ночным энурезом. Отмечаются периодические боли в животе, метеоризм, учащение стула, изменение его консистенции, появление слизи в кале, иногда – тошнота. В клиническом анализе крови при «свежем заражении» отмечается эозинофилия, степень которой пропорциональна степени тяжести зщаболевания. Нередко наблюдается бессимптомная форма заболевания.

Описторхоз – биогельминтоз, зооноз, вызываемый трематодами Opisthorchisfelineus (двуустка кошачья, двуустка сибирская), характеризующийся преимущественным поражением гепатобилиарной системы и поджелудочной железы. Описторхоз является природно-очаговым заболеванием. Источниками заражения являются люди и плотоядные животные (домашние и дикие), инвазированные описторхисами. Окончательными хозяевами являются человек и многочисленные виды млекопитающих (кошка, собака, свинья, лисица и другие рыбоядные). Промежуточный хозяин (дополнительный) – рыбы семейства карповых (Caprinidae): язь, линь, плотва, елец, голавль, густера, лещ, краноперка, подуст, чехонь и др. С фекалиями окончательного хозяина яйца гельминта оказываются во внешней среде и попадают в воду различных водоемов (при сбросе сточных вод, смыве нечистот и др.путями). Заражение человека и хищных млекопитающих происходит при употреблении в пищу сырой, недостаточно термически обработанной и слабопросоленной рыбы, инвазированной метацеркариями описторхиса.

При переваривании инвазированной рыбы в двенадцатиперстной кишке метацеркарии выходят из оболочки и по общему желчному и панкреатическому протокам проникают в печень, желчный пузырь и поджелудочную железу, где через 2 недели достигают половой зрелости и через месяц начинают откладывать яйца. Синдром интоксикации возникает в результате всасывания в кровь выделяемых гельминтами токсических продуктов обмена веществ и продуктов гибели гельминтов.

Инкубационный период описторхоза составляет от 2 до 6 недель. Симптомы разнообразны и зависят от степени тяжести течения заболевания: температура до 38°С, жалобы на умеренную слабость и повышенную утомляемость, высыпания, зуд кожи, заторможенность или возбуждение, бессонница, отчетливо проявляются признаки поражения внутренних органов: упорные приступообразные боли в эпигастрии и правом подреберье, тошнота, рвота, вздутие живота, расстройства стула. У некоторых больных развивается поражение респираторного тракта: появляются кашель, боли в грудной клетке при дыхании, одышка, рентгенологически в легких выявляются мигрирующие инфильтраты или пневмония.

Тениоз – кишечная паразитарная инвазия, вызываемая ленточными червями. Возбудителями тениоза у человека являются три вида паразита: Taenia solium, Taenia saginata и Taenia asiatica. Серьезную опасность для здоровья представляет только T. solium.

Инфицирование человека T. solium происходит в результате попадания в организм личинок паразита (цистицерков) при употреблении в пищу зараженной ими свинины, не прошедшей надлежащую термическую обработку.

Яйца ленточного червя выделяются с калом носителей ленточного червя и заражают окружающую среду в случае дефекации в необорудованных местах.

Фактором заражения яйцами T. solium также является несоблюдение личной гигиены (заражение фекально-оральным путем) или употребление зараженной пищи или воды.

Из попавших в желудочно-кишечный тракт яиц T. solium вылупляются личинки (называемые цистицерками), которые мигрируют в ряд внутренних органов. При попадании в центральную нервную систему они могут приводить к развитию неврологических симптомов (нейроцистицеркоза), в том числе приступов эпилепсии.

Дифиллоботриозы – это природноэндемичные пероральные биогельминтозы, возбудителями которых являются ленточные гельминты (класс «цестоды», отряд «лентецы», семейство «дифиллоботрииды»). В половозрелой стадии все дифиллоботрииды паразитируют у человека и хищных млекопитающих. К настоящему времени известны несколько видов лентецов, у человека в основном паразитирует D. latum – широкий лентец. Лишь у небольшой части больных развиваются выраженные клинические формы дифиллоботриоза. Больные жалуются на слабость, сонливость, снижение концентрации внимания Механическое действие широкого лентеца проявляется препятствием к нормальному продвижению по кишечнику перевариваемой пищи, ущемлением слизистой оболочки тонкой кишки присосками лентеца –ботриями, скоплением паразитов в кишке вплоть до непроходимости кишечника.

Токсико-аллергическое действие возникает в результате выделения лентецом продуктов обмена, являющихся аллергическими комплексами, сенсибилизирующими организм человека и оказывающими на него токсическое действие. Это приводит к угнетению нормальной витаминообразующей флоры кишечника, нарушению биоценоза кишечника. Дефицит витамина В12 развивается у инвазированных широким лентецом детей в результате поглощения этого витамина лентецом. Иногда удается пальпировать слегка увеличенную и умеренно болезненную печень, увеличенную селезенку. При паразитировании большого числа лентецов описаны случаи динамической и обтурационной кишечной непроходимости.

Общим для данных паразитарных заболеваний является:
 

• Общие пути заражения
• Сходные клинические проявления
• Неспецифичность, разнообразность симптомов и проявлений
• Нередко  заболевания протекают долго бессимптомно

Основным методом лабораторной диагностики  является паразитологический - применяется микроскопическое исследование кала на гельминты с применением методов обогащения (Parasep) или соскоба с перианальных складок для обнаружения яиц остриц (энтеробиоз). В фекалиях пациента обнаруживаются яйца, фрагменты стробилы  и при положительном результате не требуется дополнительных исследований. Пациентам после лечения рекомендуется проведение контрольного микроскопического исследования через месяц. Положительный результат серологического теста не является основанием для подтверждения диагноза и назначения антигельминтной терапии.

Но!! У микроскопического метода есть ограничения:

• Низкая чувствительность (невозможность применения для выявления инвазий низкой интенсивности);
• Строгие требования к хранению исследуемого материала (не более суток);
• Разрушение яиц, цист простейших при несоблюдении режима транспортирования и хранения образцов;
• При паразитировании самцов и неполовозрелых самок гельминтов яйца гельминтов обнаружить не удается;
• Значительно затруднено их выявление в миграционной стадии жизненного цикла;
• Высокие требования к квалификации врача-лаборанта в области паразитологии.

Современный метод выявления паразитарных инфекций – ПЦР-исследование кала. Преимущества использования теста «Гельмо-скрин»:

• Обнаружение ДНК паразита: точность идентификации – меньше спорных ситуаций;
• Стандартизация метода исследования, исключение ошибок лаборатории
• Подтверждение сомнительных результатов микроскопического исследования и ИФА

ПЦР-тест может быть применим как самостоятельное исследование, так и совместно с традиционным микроскопическим анализом кала с целью повышения чувствительности и специфичности.