Посев мокроты на микрофлору, в том числе на грибы рода Candida, и определение чувствительности к антимикробным и антимикотическим препаратам

Метод исследования: бактериологический. Идентификация микроорганизма проводится методом масс-спектрометрии на приборе Microflex Brucker методом MALDI TOF.

Целью данного исследования является идентификация и количественное определение условно-патогенной и патогенной микрофлоры нижних дыхательных путей и определение чувствительности к антибиотикам и антимикотическим препаратам.

Интенсивность роста микроорганизмов может выражаться в количестве колоний образующих единиц в 1 мл диагностического материала и условно соответствует обильному росту сливающихся колоний (10^8), массивному росту изолированных колоний (10^7), умеренному рост у (10^5-10^6).

Исследование подразумевает выделение аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры, не предусматривает выделение облигатных анаэробов, простейших, уреаплазм/микоплазм, а также  микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Neisseria meningitides, Neisseria gonorrhoeae, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Corynebacterium diphtheriae).

Показания к исследованию:

• выявление возбудителя инфекционного процесса;
• дифференциальная диагностика;
• оценка эффективности терапии.

Одна из ключевых проблем лечения бактериальной инфекции – выбор антибактериального препарата,  соблюдение показаний к их применению, подбор  правильной  дозировки, поскольку возникающая при бесконтрольном лечении антимикробными препаратами резистентность к противомикробным средствам – серьезная проблема, представляющая угрозу для здоровья людей.  Основной целью определения (оценки) чувствительности микроорганизмов к антибиотикам  является прогнозирование их эффективности при лечении инфекций у конкретного пациента.
Для лечения бактериальных заболеваний могут применяться либо антибиотики, либо бактериофаги, либо проводят совместную терапию.
Выбор препаратов для определения антибиотикочувствительности проводится  согласно руководству Европейского комитета  по определению чувствительности к антимикробным препаратам (EUCAST), в котором для каждого вида микроорганизма регламентируется определенный перечень препаратов, чувствительность к которым необходимо проверить. Определение чувствительности к антибиотикам  в лаборатории проводится стандартизованным диско-диффузионным методом. В питательную среду с ранее внесенной бактериальной суспензией помещают  диски с антибиотиками. Проводят инкубацию в течении 18-24 часов.  Вследствие диффузии препарата  происходит подавление роста микроорганизмов, и по диаметру зон задержки роста судят о чувствительности культуры. Интерпретация результатов:  на  бланке теста для каждого препарата  будут обозначения в виде букв R или S или I.  R (Resistant) – резистентность бактерий к данному бактериофагу или антибиотику, S (Sensitive) – чувствительность возбудителя к препарату. Буква I обозначает чувствительность при увеличенной экспозиции препарата.


Тесты по определению чувствительности к противогрибковым препаратам выполняют в отношении дрожжевых возбудителей микозов, если вызванная ими инфекция имеет тяжелое течение, если отмечается неэффективность начальной терапии, или же у пациента возникает
рецидив заболевания, а также, если наличие резистентности невозможно определить на основании идентификации вида возбудителя.
Используются тест-системы производства  компании Bio-Rad Биорад в виде микропланшетов, в лунках которых содержатся две  концентрации  шести антигрибковых препаратов.  Тестирование грибковой суспензии на чувствительность проводится в течение 48часов. Чувствительность или устойчивость препарата определяется по восстановлению цветового индикатора, находящегося в лунках микропланшета.