Посев мокроты на Candida и определение чувствительности к антимикотическим препаратам

Этиологически значимыми микроорганизмами в данном биоматериале являются:

• Грибы рода Candida.

Метод исследования: бактериологический. Идентификация микроорганизма проводится методом масс-спектрометрии на приборе Microflex Brucker методом MALDI TOF.

Метод диагностики инфекций нижних дыхательных путей (пневмония, бронхит, абсцесс легкого, эмпиема плевры и др.), вызванных грибами рода Candida, заключающийся в количественном посеве патологического материала на чашки с питательными средами с последующим определением концентрации грибов. Как правило, этиологически значимыми возбудителями кандидозных инфекций нижних дыхательных путей считаются грибы рода Candida, выделенные из исследуемого образца в концентрации 10^4 и выше КОЕ/мл. Род Candida spp. насчитывает около 150 видов, из которых около 20 — клинически значимы для человека. Наиболее актуальные виды Candida spp.: C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata, C. krusei, C. kefyr, C. lusitaniae

Согласно классификации глубоких кандидозов (А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев, 2001) выделяют кандидоз нижних дыхательных путей, который включает кандидоз трахеи и крупных бронхов (кандидный трахеобронхит), кандидоз легких (кандидная бронхопневмония), аллергический бронхолегочный кандидоз.

При поражении бронхов заболевание протекает легко и напоминает хронический бронхит. Незначительно повышается температура, возникает кашель со скудной мокротой стекловидного характера, иногда с примесью крови. Клинически и рентгенологически выявляются признаки бронхита.

При легочной локализации кандидоза начало бывает внезапным, с высокой температурой и мучительным кашлем, выделением гнойной мокроты с примесью крови. Клинически и рентгенологически обнаруживается инфильтрация легких, причем обычно диагностируют пневмонию или бронхопневмонию. В легких выслушиваются сухие и единичные влажные хрипы. В крови имеет место увеличение СОЭ, лейкоцитоз, иногда эозинофилия. На рентгенограмме определяется облаковидное затемнение участка легких, чаще в нижних отделах. При подостром течении заболевания наблюдаются так называемые открытые формы кандидомикоза легких — образуются полости, подверженные хроническому нагноению. Болезнь протекает с гектической температурой, отмечается потливость, общее состояние тяжелое. Эта форма напоминает туберкулез легких.

Бронхиальную форму кандидоза дифференцируют с простым бронхитом, астматическим бронхитом, туберкулезом бронха. Следует также дифференцировать грибковое поражение с легочным лимфогранулематозом, паразитарными заболеваниями легких, другими микозами (аспергиллез, гистоплазмоз, кокцидиоидоз, споротрихоз).

Выделение С. albicans в микробиологической диагностике кандидоза — основной тест, так как этот вид обусловливает 80—90% поражений. Диагностика кандидоза легких всегда должна базироваться на комплексе клинических, рентгенологических и лабораторных данных.

Определение чувствительности кандид к антимикотическим препаратам производится только при выделении из исследуемой пробы этиологически значимого возбудителя в соответствующей концентрации. Кандиды, выделенные из исследуемого образца в концентрации менее 10^4 КОЕ/мл, не являются этиологически значимыми и не требуют определения чувствительности к антимикотикам (кандидозное носительство).

Показания к исследованию:

• выявление возбудителя инфекционного процесса;
• дифференциальная диагностика инфекционного процесса;
• оценка эффективности терапии противогрибковыми препаратами.

Тесты по определению чувствительности к противогрибковым препаратам выполняют в отношении дрожжевых возбудителей микозов, если вызванная ими инфекция имеет тяжелое течение, если отмечается неэффективность начальной терапии, или же у пациента возникает
рецидив заболевания, а также, если наличие резистентности невозможно определить на основании идентификации вида возбудителя.
Используются тест-системы производства  компании Bio-Rad Биорад в виде микропланшетов, в лунках которых содержатся две  концентрации  шести антигрибковых препаратов.  Тестирование грибковой суспензии на чувствительность проводится в течение 48часов. Чувствительность или устойчивость препарата определяется по восстановлению цветового индикатора, находящегося в лунках микропланшета.